Фон для подложки: Фон подложка (64 фото)

{{l10n_strings.DRAG_TEXT_HELP}}

{{article.content_lang.display}}

{{l10n_strings.AUTHOR_TOOLTIP_TEXT}}

Как сделать подложку в Word

В Word можно использовать не только стандартные подложки («Черновик», «Конфиденциально» и «Не копировать»), но также и создавать свои.

Выберите вкладку Дизайн, в группе Фон страницы нажмите кнопку Подложка.

Откроется меню с выбором подложек. Выберите нужную подложку и она отобразится на каждой странице, кроме заглавной.

Чтобы изменить подложку во вкладке Дизайн, в группе Фон страницы нажмите кнопку Подложка и щелкните пункт Настраиваемая подложка в нижней части коллекции подложек. Откроется окно Печатная подложка.

Для изменения текста подложки, выберите Текст и введите его в разделе Текст или выберите готовый вариант из раскрывающегося списка.

Также здесь присутствует возможность выбрать шрифт, размер, цвет и другие параметры подложки. Как все будет готово, нажмите кнопку Применить.

Вставка рисунка в качестве подложки

В Word 2016 существует возможность разместить в качестве подложки какой-нибудь рисунок или логотип своей фирмы.

ВАЖНО:
Чтобы быстро вставить фоновое изображение, добавьте его в качестве настраиваемой подложки. Если вы хотите иметь больше возможностей настройки фонового рисунка, вставьте его как верхний колонтитул.

Добавление фонового рисунка как настраиваемой подложки

Это самый быстрый способ с минимальным набором форматирования.
Выберите вкладку Дизайн, в группе Фон страницы нажмите кнопку Подложка.

В открывшемся меню выберите пункт Настраиваемая подложка.

Появится окно Печатная подложка. Щелкните Рисунок > Выбрать и выберите нужный вам рисунок. Выбрать рисунок можно с помощью обзора папок или поиска. Нажмите кнопку Вставить.

В разделе Масштаб выберите нужный масштаб, чтобы вставить рисунок определенного размера. Сделайте масштаб достаточно большим, чтобы рисунок занял всю страницу, или оставьте значение авто.

Можно сделать рисунок более светлым, установив флажок обесцветить, чтобы он не мешал восприятию текста.

Нажмите кнопку ОК.

Добавление фонового рисунка с дополнительными параметрами форматирования

Вставить фоновый рисунок в качестве верхнего колонтитула сложнее, но это позволит лучше настроить его отображение.
На вкладке Вставка в группе Колонтитулы, выберите Верхний колонтитул и в появившемся меню выберите пункт Изменить верхний колонтитул.

В появившейся вкладке Работа с колонтитулами щелкните Рисунки.

Теперь найдите на компьютере нужное изображение и нажмите кнопку Вставить.

На вкладке Работа с рисунками щелкните Положение, а затем в группе Обтекание текстом выберите расположение

На вкладке Работа с рисунками в группе Упорядочение, щелкните Обтекание текстом и выберите За текстом.

В группе Изменение установите нужные вам параметры. Например, чтобы рисунок был светлее и не мешал чтению текста, щелкните Цвет и в списке Перекрасить выберите вариант Обесцветить.

Как все будет готово, на вкладке Работа с колонтитулами, нажмите кнопку Закрыть окно колонтитулов.

Добавление фона или подложки

1. В меню Формат выберите команду Фон или нажмите на правую кнопку, в появившемся меню выбираем Фон.

2. В диалоговом окне Фон можно выбрать:

· выберите нужный цвет из предложенных;

· нажмите кнопку Другие цвета для просмотра дополнительных цветов;

Выходит диалоговое окно Цвета, на вкладке Обычные даны дополнительные цвета:

На вкладке Спектр можно выбрать дополнительные цвета перетаскивая «крести» по спектру цветов, нужный цвет мы можем увидеть в образце «новый»:

· нажмите кнопку Способы заливки, чтобы изменить или добавить спецэффекты, такие как градиентная заливка, текстура, узор или вставить рисунок, фотографию. Выходит диалоговое окно Способы заливки:

Выбрав вкладку Градиентная можно выбрать фон слайда с переходом от одного цвета на другой (по умолчанию белый и чёрный). Можно поменять тремя способами:

1) Если выбираем Цвет – один цвет, мы можем поменять один цвет (белый), чёрный цвет остаётся по умолчанию.

2) Если выбираем Цвет – два цвета, можем выбрать два цвета.

Прозрачность – От задаёт прозрачность цвета (белого или выбранного вместо белого).

Прозрачность — До задаёт прозрачность цвета (чёрного или выбранного вместо чёрного).

3) Если выбираем Цвет – заготовка, появляются заготовки:

Тип штриховки даёт выбор штриховки горизонтальная, вертикальная, диагональная 1, диагональная 2, из угла и от заголовка. И четыре варианта, нажав мышкой на нужный вариант:

Если на диалоговом окне Способы заливки выбираем вкладку Текстура, то можно фону слайда предать текстуру из предложенных:

Если из предложенных текстур нет нужной, а у вас есть картинка текстуры, то её можно поставить с помощью кнопки Другая текстура… В окне Выбор текстуры выбираем папку, где находится текстура, нажимаем на неё мышкой (выбираем) и нажимаем кнопку Вставить:

Если на диалоговом окне Способы заливки выбираем вкладку Узор, то можно фону слайда предать узор из предложенных:

У узора можно поменять цвет, изменив цвет у Штриховки или у Фона:

Если на диалоговом окне Способы заливки выбираем вкладку Рисунок, то можно фону слайда предать рисунок или фотографию, которую вы бы хотели, нажав на кнопку Рисунок:

В окне Выбор рисунка выбираем папку, где находится рисунок, нажимаем на неё мышкой (выбираем) и нажимаем кнопку Вставить:

Выбранный рисунок подтверждаем кнопкой ОК:

Фон – рисунок или фотография даёт преимущество перед просто рисунком растянутым на слайде по краям слайда, тем, что рисунок становится неподвижным.

Вставка рисунка

Вставка рисунка из файла

1. В меню Вставка выберите команду Рисунок, а затем — команду Из файла…:

2. Найдите рисунок, который требуется вставить.

3. Дважды щелкните рисунок, который требуется вставить.

Или скопировав рисунок из паки, где он находится, нажмите правую кнопку мышку по слайду выбрав Вставить:

Изменение настройки рисунка

1. Рисунок можно настроить с помощью панели Настройка изображения. Если нажать по рисунку появляется панель Настройки изображения. Если её нет, то её можно вывести, в меню Вид выделите пункт Панели инструментов, а затем выберите команду Настройка изображения или нажав на правую кнопку, в вышедшем меню есть пункт Отобразить панель настройки изображения, нажимаем по этому пункту

то появится панель Настройки изображения:

С помощью этой панели мы сможем:

Отрегулируйте уровни контрастности и яркости рисунка с помощью кнопок Увеличить контрастность , Уменьшить контрастность , Увеличить яркость  и Уменьшить яркость

В целях экономии места на жестком диске или сокращения времени загрузки можно использовать команду Сжатие рисунков  

Чтоб применить сжатие сразу на все рисунки на диалоговом окне Сжатие рисунков выбираем в Применить — ко всем рисункам документа, в Изменить разрешение — для Интернета и экрана.

Уменьшение разрешения происходит с удалением неиспользуемых данных, например, после обрезки .

Для обрезки (удаление вертикальных или горизонтальных краев объекта, часто выполняется с целью сосредоточения внимания на конкретном фрагменте.) любых рисунков, кроме анимированных рисунков в формате GIF Выделите рисунок, который требуется обрезать.

Установите указатель обрезки на маркер изменения размера, а затем выполните одно из следующий действий:

· чтобы обрезать одну сторону, перетащите к центру рисунка маркер, расположенный в середине соответствующей стороны;

· чтобы равномерно обрезать сразу две стороны, перетащите к центру рисунка маркер, расположенный в середине одной из сторон, удерживая нажатой клавишу CTRL;

· чтобы равномерно обрезать сразу все четыре стороны, перетащите к центру рисунка один из угловых маркеров, удерживая нажатой клавишу CTRL.

Нажмите кнопку Обрезка на панели инструментов Настройка изображения, чтобы отключить команду Обрезка.

С помощью кнопки Установить прозрачный цвет , можем создать в рисунке прозрачные области.

Щелкните цвет, который требуется сделать прозрачным.

Кнопка Установить прозрачный цвет доступна для точечных рисунков, точечные рисунки обычно имеют расширение .bmp.

С помощью кнопки Цвет, можем рисунок сделать чёрно –белого изображения , с оттенками серого или подложкой:

Этот рисунок (подложку), мы сможем сделать фоном, предварительно сохранив рисунок, для этого по рисунку нажмём правую кнопку и в меню выберем пункт Сохранить рисунок как…

И вставив фон, как делали раньше фон из рисунка.

Блог компании ДипломТайм (DiplomTime) Подложка Word

Сталкиваясь с необходимостью заполнять важную форму в гос учреждении, Вы, наверное, не раз замечали большую надпись «Образец» написанную поверх листа. Эта надпись называется «подложка» и её можно установить в стандартном редакторе Word.

Сразу после создания документа Microsoft Office Word 2007 необходимо настроить параметры страницы. В этом случае не надо будет каждый раз форматировать текст. Одним из вариантов оформления документа Microsoft Office Word является подложка. Подложка — это изображение или текст, который находится непосредственно под основным слоем текста. Этот вид оформления позволяет нанести в качестве фона эмблему, рисунок или другой объект. С помощью подложки документу можно придать деловой или праздничный вид.

Часто в государственных организациях используют различные образцы для заполнения документов. Использование подложки с надписью «образец» сразу даст понять человеку, как правильно заполнять пустые поля.

1. Чтобы установить подложку вам необходимо кликнуть по вкладке «Разметка страницы», далее переходите в раздел «Фон страницы». Вверху раздела есть иконка «Подложка». Нажимаете на эту иконку. Всплывает окно со стандартными шаблонами. Здесь представлены следующие варианты: «образец» и «черновик».

2. Если вы хотите настроить подложку самостоятельно, то в открывшемся окошке «подложка» кликаете по фразе «настраиваемая подложка». Здесь два варианта оформления страницы: текст и рисунок.

3. Подложка в виде рисунка. В окне «настраиваемая подложка» ставите галочку рядом со словом рисунок. Далее жмете кнопку «выбрать». Находите необходимое вам изображение, далее «вставить». После того, как выбрана картинка, следует установить ее размер. Для этого следует установить масштаб: авто, 500%, 100% и т.д. Если изображение слишком яркое, то его можно сделать полупрозрачным. Для этого необходимо поставить галочку рядом со словом «обесцветить».

4. Чтобы установить текст в подложке необходимо в разделе «настраиваемая подложка» поставить галочку рядом с подразделом «текст». Далее вы устанавливаете язык (русский, английский и т.д.). Следующий шаг — набираете текст, например: «для служебного пользования». Устанавливаете шрифт текста, размер и цвет букв. Подложка также может быть обесцвечена, для этого устанавливаете галочку рядом со словом «полупрозрачный». Текст обычно располагается по горизонтали или по вертикали страницы.

5. Но если настроенная вами подложка не нравится или не подошла, то ее легко удалить. Для этого заходите в раздел «разметка страницы», далее «подложка», далее «удалить подложку».

Как сделать подложку в word 2016?

В Word 2016 есть возможность создавать подложки, едва различимый текст (конфиденциально, срочно, не копировать, образец, черновик и т.д.) или картинки на фоне которых будет отображаться содержимое страницы.

В Word можно использовать не только стандартные подложки («Черновик», «Конфиденциально» и «Не копировать»), но также и создавать свои.

Выберите вкладку Дизайн, в группе Фон страницы нажмите кнопку Подложка.

Откроется меню с выбором подложек. Выберите нужную подложку и она отобразится на каждой странице, кроме заглавной.

Чтобы изменить подложку во вкладке Дизайн, в группе Фон страницы нажмите кнопку Подложка и щелкните пункт Настраиваемая подложка в нижней части коллекции подложек. Откроется окно Печатная подложка.

Для изменения текста подложки, выберите Текст и введите его в разделе Текст или выберите готовый вариант из раскрывающегося списка.

Также здесь присутствует возможность выбрать шрифт, размер, цвет и другие параметры подложки. Как все будет готово, нажмите кнопку Применить.

Вставка рисунка в качестве подложки

В Word 2016 существует возможность разместить в качестве подложки какой-нибудь рисунок или логотип своей фирмы.

ВАЖНО:
Чтобы быстро вставить фоновое изображение, добавьте его в качестве настраиваемой подложки. Если вы хотите иметь больше возможностей настройки фонового рисунка, вставьте его как верхний колонтитул.

Добавление фонового рисунка как настраиваемой подложки

Это самый быстрый способ с минимальным набором форматирования.
Выберите вкладку Дизайн, в группе Фон страницы нажмите кнопку Подложка.

В открывшемся меню выберите пункт Настраиваемая подложка.

Появится окно Печатная подложка. Щелкните Рисунок > Выбрать и выберите нужный вам рисунок. Выбрать рисунок можно с помощью обзора папок или поиска. Нажмите кнопку Вставить.

В разделе Масштаб выберите нужный масштаб, чтобы вставить рисунок определенного размера. Сделайте масштаб достаточно большим, чтобы рисунок занял всю страницу, или оставьте значение авто.

Можно сделать рисунок более светлым, установив флажок обесцветить, чтобы он не мешал восприятию текста.

Нажмите кнопку ОК.

Добавление фонового рисунка с дополнительными параметрами форматирования

Вставить фоновый рисунок в качестве верхнего колонтитула сложнее, но это позволит лучше настроить его отображение.
На вкладке Вставка в группе Колонтитулы, выберите Верхний колонтитул и в появившемся меню выберите пункт Изменить верхний колонтитул.

В появившейся вкладке Работа с колонтитулами щелкните Рисунки.

Теперь найдите на компьютере нужное изображение и нажмите кнопку Вставить.

На вкладке Работа с рисунками щелкните Положение, а затем в группе Обтекание текстом выберите расположение по центру.

На вкладке Работа с рисунками в группе Упорядочение, щелкните Обтекание текстом и выберите За текстом.

В группе Изменение установите нужные вам параметры. Например, чтобы рисунок был светлее и не мешал чтению текста, щелкните Цвет и в списке Перекрасить выберите вариант Обесцветить.

Как все будет готово, на вкладке Работа с колонтитулами, нажмите кнопку Закрыть окно колонтитулов.

Программа «Ворд» предоставляет своим пользователям возможность создать подложку для документа. Более того, в исходном виде программа имеет ряд шаблонов, которые наиболее актуальны. Но возможность создать свою подложку все ровно остается. Конечно, есть некоторое неудобство – при добавлении фона на один лист он продублируется на все остальные. То есть нельзя вставить на отдельные листы разные подложки. В этом случае нужно создавать новый документ. Однако есть маленькая хитрость, о которой будет рассказано в самом конце статьи.

Итак, рассмотрим, как сделать подложку в «Ворде». Ниже будут разобраны три варианта. Первый заключается во вставке стандартного фона. Второй – в создании собственного. А третий позволит вам добавлять разные подложки в одном документе.

Добавляем стандартную подложку

Как сделать подложку в «Ворде», используя для этого стандартные средства?

А делается это достаточно просто. В первую очередь вам необходимо перейти во вкладку «Дизайн» («Разметка страницы»). В этой вкладке нажмите на кнопку «Подложка», которая находится на панели инструментов в области «Фон страницы».

После нажатия на кнопку снизу появится окно, в котором вам предложат на выбор разные виды подложек. Как можно заметить, для лучшей навигации они разбиты по группам: «Заявление об ограничении ответственности», «Секретно» и «Срочно». Вам остается лишь выбрать необходимую и клацнуть по ней левой кнопкой мыши.

Вот и все. Вы узнали, как сделать подложку в «Ворде», используя для этого имеющиеся в программе шаблоны.

Делаем собственную подложку

Но что, если в списке вы не нашли нужный вам вариант? Давайте разберемся, как сделать подложку в «Ворде» самостоятельно.

Вам, как и в прошлый раз, необходимо перейти во вкладку «Дизайн» и нажать на кнопку «Подложка». Только на этот раз в выпадающем меню нужно выбрать пункт «Настраиваемая подложка».

По итогу откроется окно «Печатная подложка». В нем и будут проводиться настройки добавляемого фона. Для начала установите переключатель на пункт «Рисунок» или «Текст» в зависимости от того, что хотите использовать.

Если вы решили использовать рисунок, то установите масштаб и с помощью кнопки «Выбрать» проложите путь к картинке.

Если используете текст, то вам необходимо изначально указать язык вводимого текста, потом ввести непосредственно сам текст, выбрать его шрифт, цвет и размер. Также вы можете определить его положение – по горизонтали или диагонали.

Остается лишь нажать кнопку ОК, и сделанная вами подложка появится на листе. Теперь вы знаете, как сделать разную подложку в «Ворде», чтобы она не была похожа ни на одну из предложенных.

Добавляем разные подложки на каждом листе

Пользователи часто задаются вопросом, как сделать несколько подложек в «Ворде». Неудивительно: разработчики попросту не предусмотрели такую возможность. Но есть небольшая хитрость, о которой и пойдет сейчас речь.

Вместо подложки можно вставлять разные рисунки на разные листы и делать их полупрозрачными – так, чтобы их нельзя было отличить от самих подложек. К слову, рисунки можно найти в интернете.

Итак, изначально добавим рисунок. Для этого перейдите на вкладку «Вставка» и в области «Иллюстрации» нажмите по одноименной кнопке. Теперь в «Проводнике» укажите путь к картинке и откройте ее.

Нажмите на картинку и перейдите во вкладку «Формат». Там нажмите на кнопку «Обтекание текстом» и в выпадающем меню выберите «За текстом».

Остается лишь сделать картинку серой и прозрачной. Для этого в этой же вкладке нажмите на «Коррекция», и в меню выберите «Параметры коррекции рисунка». В окошке справа в группе «Цвет рисунка» напротив пункта «Перекрасить» нажмите на значок. В выпадающем списке выберите «Серый 25%, светлый цвет фона 2».

Вот и все – импровизированная подложка готова.

Здравствуйте дорогие читатели блога www.softo-mir.ru. Сегодня хочу продолжить серию уроков по работе с Microsoft Office 2016. В данной статье разберем несколько вопросов. Таких как изменение цвета фона в документах Word а также установки в качестве фона различных узоров и картинок. Ну и расскажу как сделать подложку в документе. На самом деле это должны знать все пользователи продуктов Office. Но если у вас возникли трудности, то не беда. Для таких людей я и написал эту статью.

Как изменить цвет фона в Word 2016

И так если вам нужно поменять цвет фона в документах Word то для этого нужно сделать несколько кликов мышкой. Для начала запускаем нужный документ или создаем новый специально для тренировки. Переходим во вкладку Дизайн. И справа ищем пункт Фон Страницы. Кликаем на пункт Цвет страницы и выбираем необходимый.

Если необходимого цвета нету, то кликаем на пункт Другие цвета.

В отрывшемся окне можно подобрать любой цвет.

Как поставить узор или картинку вместо фона в документах Word

Для этого необходимо также как и в предыдущем пункте перейти в Дизайн и кликнуть Цвет страницы и выбрать пункт Способы заливки.

В окне Способы заливки можно выбрать Градиент, Текстуру, Узор а также на вкладке Рисунок можно выбрать любую картинку.

Подложка — это просто слово которые будет подсвечиваться на всех документах, например, Образец или Черновик. В Microsoft Office 2016 уже есть список стандартных подложек, но можно добавить свою и написать любой текст, который вы захотите. Тут также переходим во вкладку Дизайн и смотрим пункт Фон страницы. Выбираем Подложка и отмечаем нужный текст.

Для того чтобы создать свою надпись нужно выбрать Настраиваемая подложка.

В отрывшемся окне можно также выбрать рисунок или текст. В поле текст пишем нужную фразу выбираем шрифт размер цвет текст в общем настраиваем все поля по необходимость и кликаем Применить.

Ну вот в принципе и все! Вроде бы все рассказал если что-то не понятно спрашивайте обязательно отвечу. Надеюсь кому-то помог.

Подложка в ворде

В разделе Программное обеспечение на вопрос как сделать в ворде, когда делаешь подложку, чтобы текст на странице не прерывал картинку подложки заданный автором Вровень лучший ответ это Office 2007. Чтобы нанести полупрозрачную надпись (например ОБРАЗЕЦ, ЧЕРНОВИК) надо щёлкнуть по «Разметка страниц» и в «Фон страницы» щёлкнуть «Подложка» и потом выбрать нужный вариант. Подложки устанавливаются на все листы
В данном случае текст будет поверх подложки.
Если вы хотите чтобы текст не перекрывал рисунок то это должен быть РИСУНОК.
Нанесение текста поверх рисунка Office 2007. Если поверх рисунка надо нанести текст то надо щёлкнуть по рисунку левой правой и в появившемся меню навести курсор на «Обтекание текстом» и когда появится меню навести курсор на «За текстом» и щёлкнуть.
Текст не печатается рядом с рисунком Office 2007. Текст не печатается рядом с рисунком в том случае, если рисунок занимает всю ширину листа. Видимая часть рисунка это ещё не всё. Если вы активируете рисунок, то будет видно, сколько места он занимает. Это в том числе и фон под рисунком. В таком случае надо скопировать рисунок в Paint и там ещё раз копировать, но только рисунок без фона (для выделения копируемого рисунка курсор ставить как можно ближе к рисунку) и перенести в Word.

Ответ от Евгений Евгеньевич
подложка за текстом, она и не прерывается. Ну можно на фон поставить рисунок

Управление цветом фона и подложки

Обожаете цвета? Мы тоже.

Как компания, которая гордится своими знаниями и энтузиазмом в области цвета, X-Rite Pantone воодушевлен различными способами, которыми ArtPrize демонстрирует силу цвета.

Каждую осень ArtPrize устанавливает более 1000 произведений искусства в центре Гранд-Рапидс, привлекая тысячи посетителей. Используя согласованные цвета в путеводителях, знаках, баннерах, флагах и товарах, ArtPrize создает красочную карту, которая помогает посетителям и местным жителям увидеть город с другой точки зрения.

Для большинства компаний такая однородность цвета дается нелегко. Независимо от того, используете ли вы цвет для активации самого посещаемого художественного мероприятия в мире, печати этикеток для крупного бренда или смешивания пластиковых гранул для производства игрушечного автомобиля, непоследовательный цвет может заставить потребителей усомниться в качестве и может повлиять на целостность бренда.

Сегодня мы рассмотрим, почему цвет фона и подложки так важен, и как ArtPrize успешно справился с этой переменной при производстве.

Цветовые палитры не подходят всем.
Самая большая проблема, с которой ArtPrize столкнулась при наполнении Гранд-Рапидс цветом, заключалась не в выборе самих цветов. Так с ними обращались разные поверхности.

Вот цветовая палитра ArtPrize Eight.

Эти цвета наносятся на городские тротуары, баннеры, путеводители и различные товары.

Если бы ArtPrize использовал один и тот же цвет для всех приложений — белый гофрокартон, коричневую газетную бумагу, нейлоновые флажки, бетонный тротуар, разноцветные футболки и шляпы, результаты были бы далеко не согласованными.Это потому, что цвет фона может просвечивать и смешиваться с чернилами и красителями, чтобы изменить внешний вид цвета.

Кроме того, разные материалы по-разному впитывают красители. В то время как некоторые, например хлопковая футболка, легко впитывают краску, другие поверхности сложнее раскрасить и требуют нескольких слоев или корректировки формулы, чтобы получить правильный цвет.

Управление цветом может помочь.

ArtPrize заручился поддержкой местной дизайнерской фирмы Conduit Studio и X-Rite Pantone, чтобы обеспечить единообразие цветов на каждой поверхности.Вот процесс управления цветом, который у них сработал.

1. Каждому цвету дали имя. Передать цвет очень сложно. То, что для вас может быть темно-красным, для кого-то может означать совершенно другой цвет. Это вызывает проблемы, когда целью является координация всего мероприятия с несколькими поставщиками, производящими цвет.

Как и многие наши заказчики в сфере печати и промышленности, Conduit Studio использовала золотой стандарт для определения и передачи своей палитры ArtPrize — PANTONE ^® Color Matching System .Предоставление доступа к образцам PANTONE всем, кто участвует в создании цвета, устанавливает четкие ожидания и предоставляет физический ресурс, который помогает определить, одобрять или отклонять задания.

Новая коллекция PANTONE MASTER COLLECTION для графических дизайнеров включает 10 000 цветов PANTONE для мгновенного соответствия.

2. Сделали корректировки для согласованности. Для достижения заданного цвета в каждом приложении требовалась собственная рецептура, учитывающая тип поверхности и цвет фона материала.Используя небольшое устройство для измерения цвета, Conduit Studio измерила цвета на каждом из материалов, сравнила их с исходными цветами, чтобы убедиться, что они совпадают, и внесла коррективы, чтобы получить идеальный цвет. Ознакомьтесь с нашим Что такое спектрофотометр? , чтобы узнать больше.

Устройства для измерения цвета являются незаменимыми инструментами для любого рабочего процесса с цветом. Они бывают разных форм и размеров и служат для самых разных целей: от небольших портативных устройств для определения и проверки качества цвета на заводе до больших настольных приборов, используемых для обеспечения идеального состава цвета перед отправкой в ​​производство.

Небольшое портативное устройство CAPSURE — фаворит дизайнеров, желающих выбирать и передавать вдохновляющие цвета.

3. Считали освещение. Когда поступили образцы вывесок и товаров, сотрудники просмотрели и сравнили их при всех условиях освещения в помещениях ArtPrize, таких как уличное, вольфрамовое и флуоресцентное, чтобы убедиться, что цвета остаются неизменными.

Как ни странно это звучит, но сами предметы не имеют цвета. Их красители обладают свойствами, которые определяют, какие длины волн света поглощаются, а какие отражаются.Это смесь отраженного света, который попадает в наши глаза и дает нам восприятие цвета. Поэтому, если в свете вокруг вас больше синего, как солнце в частично облачный день, цвета будут казаться более синими. Если свет будет более желтым, как лампа накаливания, все будет казаться более желтым.

Световые будки, подобные этой Judge QC , помогают производителям сравнивать целевые цвета с образцами при различных условиях освещения, чтобы определить необходимость корректировки.

Как ведущий спонсор ArtPrize Eight, мы с удовольствием наблюдали, как управление цветом воплощает это событие в жизнь с удивительной точностью.Мы с нетерпением ждем возможности помочь вам оживить ваш цвет. Свяжитесь с , чтобы узнать больше.

ржавчины — Как реализовать фоновую нить в Substrate?

Я считаю, что ответ на фьючерс — нет. Вот еще объяснение:

Я думаю, что лучше подумать о том, какие программные примитивы доступны внутри среды выполнения субстрата , вместо того, чтобы пытаться использовать концепцию программирования общего назначения ( в будущем ) и попытаться переназначить ее для среды выполнения субстрата (вверху -down vs.точка зрения снизу вверх).

Итак, давайте подумаем о жизненном цикле среды выполнения и посмотрим, что в нем имеет смысл:

Внутри среды выполнения вы как бы застряли в коробке. Код времени выполнения (wasm) порождается и выполняется (всегда родным) клиентом всякий раз, когда новый блок должен быть импортирован (или создан, но давайте предположим, что сейчас просто импорт), а убивается и откладывается впоследствии (по крайней мере, с точки зрения времени выполнения — клиент имеет время выполнения, кэширующее ).Я хочу сказать, что все, что вы не фиксируете (т.е. записываете в хранилище) в конце выполнения каждого блока, теряется. Сюда входят все локальные переменные, стек, куча и все остальное. Таким образом, даже если бы вы использовали будущее для порождения задачи, это не совсем вписывается в модель программирования сред выполнения субстрата, потому что даже если бы это будущее существовало во время выполнения, как только блок будет выполнен, экземпляр wasm будет мертв и будущее.

Это все без учета того факта, что вы можете использовать только ящики, поддерживающие no_std во время выполнения, поэтому не все библиотеки async будут доступны в любом случае.

Основным решением, как я намекал, вероятно, является то, что использует хранилище состояний для записи начальной точки аукциона, так что через x блоков вы все еще можете узнать, когда вы его начали, и если какой-то порог пройден, вы можете завершите свой аукцион. Вы можете использовать либо временную метку, либо количество блоков для продолжительности вашего аукциона. примечание: убедитесь, что это не ноль, иначе во время выполнения может произойти паника.// время закрыть аукцион. } }

Изготовление наностержней Ag на массиве микрошестов для подложки с усиленной металлом флуоресценции с высоким отношением сигнал / фон

Принадлежности Расширять

Принадлежности

• ¹ Кафедра машиностроения, Университет Яньбянь, Яньцзи, 133002, Китай; Кафедра машиностроения, Университет Чунг-Анг, Сеул, 06974, Республика Корея.
• ² Кафедра инженерии механических систем, Университет Чунг-Анг, Сеул, 06974, Республика Корея.
• ³ Кафедра машиностроения, Университет Чунг-Анг, Сеул, 06974, Республика Корея.
• ⁴ Кафедра инженерии механических систем, Университет Чунг-Анг, Сеул, 06974, Республика Корея; Кафедра машиностроения, Университет Чунг-Анг, Сеул, 06974, Республика Корея; Департамент компьютерных наук и инженерии, Университет Чунг-Анг, Сеул, 06974, Республика Корея.Электронный адрес: [email protected].

Элемент в буфере обмена

Xun Lu et al. Biosens Bioelectron. 2021 .

Показать варианты

Формат АннотацияPubMedPMID

Принадлежности

• ¹ Кафедра машиностроения, Университет Яньбянь, Яньцзи, 133002, Китай; Кафедра машиностроения, Университет Чунг-Анг, Сеул, 06974, Республика Корея.
• ² Кафедра инженерии механических систем, Университет Чунг-Анг, Сеул, 06974, Республика Корея.
• ³ Кафедра машиностроения, Университет Чунг-Анг, Сеул, 06974, Республика Корея.
• ⁴ Кафедра инженерии механических систем, Университет Чунг-Анг, Сеул, 06974, Республика Корея; Кафедра машиностроения, Университет Чунг-Анг, Сеул, 06974, Республика Корея; Департамент компьютерных наук и инженерии, Университет Чунг-Анг, Сеул, 06974, Республика Корея.Электронный адрес: [email protected].

Элемент в буфере обмена

Показать варианты

Формат АннотацияPubMedPMID

Абстрактный

Селективное изготовление металлических наноструктур в области пятен требуется для увеличения отношения сигнал / фоновый шум (SBR) подложки с усиленной металлом флуоресценции (MEF).В качестве простого и экономичного метода изготовления подложки из MEF с высоким содержанием SBR, процесс осаждения под углом (GLAD) Ag-материала на УФ-отпечатанный массив микроштырей (высота 50 мкм, диаметр 300 мкм и шаг 600 мкм) ) было предложено выборочно изготавливать наностержни Ag на вершине микроструктуры (области пятен). Образование наностержней Ag на дне микростержня уменьшалось по мере увеличения угла осаждения в Ag GLAD. Угол наплавки 89 ° и толщина наплавки 500 нм были выбраны в качестве оптимальных условий GLAD для максимального увеличения SBR.Оптимальные наностержни Ag на подложке MEF с массивом микростержней (AgNMPA) обеспечивали 71-кратное усиление сигнала флуоресценции и 25-кратное увеличение SBR по сравнению с подложкой из чистого стекла. Он также обеспечивает в 7 раз более высокий SBR, чем подложка MEF с наностержнями Ag, которая имеет аналогичную структуру наностержней Ag, но не формируется избирательно. Предел обнаружения AgNMPA был в 16 и 4 раза ниже, чем у функциональной амином стеклянной подложки и промышленного эпоксидного предметного стекла, соответственно. Хотя сигнал флуоресценции AgNMPA был подобен сигналу флуоресценции подложки наностержня Ag, предел обнаружения был в 2 раза ниже из-за низкого стандартного отклонения сигнала, вызванного низким фоновым шумом и четкой формой пятна.

Ключевые слова: Осаждение под скользящим углом; Металлическая флуоресценция; Микроматрица; Наностержни; Отношение сигнал / фоновый шум.

Copyright © 2020 Elsevier B.V.Все права защищены.

Похожие статьи

• Изготовление массива плазмонных наноантенн с использованием осаждения металла на полимерные наноимпринтные наноточки для подложки с усиленной флуоресценцией.

  Ким Дж., Аббас Н., Ли С., Йом Дж, Аскар М.А., Бадшах М.А., Лу Икс, Ким Ю.К., Ким С.М. Ким Дж. И др. Полимеры (Базель). 2020 25 декабря; 13 (1): 48. DOI: 10.3390 / polym13010048. Полимеры (Базель). 2020. PMID: 33375587 Бесплатная статья PMC.

• Металл усиливает флуоресценцию, улучшает обнаружение белков и ДНК с помощью зигзагообразных массивов наностержней серебра.

  Цзи X, Сяо Ц., Лау В.Ф., Ли Дж., Фу Дж.Джи Х и др. Biosens Bioelectron. 2016 15 августа; 82: 240-7. DOI: 10.1016 / j.bios.2016.04.022. Epub 2016 8 апреля. Biosens Bioelectron. 2016 г. PMID: 27088369

• Микрожидкостная металлическая усиленная флуоресценция для капиллярного электрофореза с помощью массивов наностержней серебра.

  Сяо Ц., Цао З., Дэн Дж., Хуан З., Сюй З., Фу Дж., Ёбас Л. Сяо С. и др. Нанотехнологии. 2014 6 июня; 25 (22): 225502.DOI: 10.1088 / 0957-4484 / 25/22/225502. Нанотехнологии. 2014 г. PMID: 24833562

• Повышенный фототок и динамический отклик в вертикально ориентированных фотопроводящих устройствах с матрицей наностержней In₂S₃ / Ag ядро ​​/ оболочка.

  Чансизоглу Х., Чансизоглу М.Ф., Ватанабе Ф., Карабакак Т. Cansizoglu H, et al. Интерфейсы ACS Appl Mater. 2014 июн 11; 6 (11): 8673-82. DOI: 10.1021 / am501481w.Epub 2014 28 мая. Интерфейсы ACS Appl Mater. 2014 г. PMID: 24824452

• Разработка чипа протеинового микрочипа с усиленной флуоресценцией для идентификации спермы и вагинальной жидкости.

  Аббас Н., Лу Икс, Бадшах М.А., Ин-Джей Би, Хео В.И., Пак К.Й., Ли МК, Ким СН, Кан Пи, Чанг В.Дж., Ким С.М., Со С.Дж. Аббас Н. и др. Датчики (Базель). 2018 10 ноября; 18 (11): 3874. DOI: 10.3390 / с18113874. Датчики (Базель). 2018. PMID: 30423842 Бесплатная статья PMC.

LinkOut — дополнительные ресурсы

• Источники полных текстов

• Другие источники литературы

• Исследовательские материалы

цитировать

Формат: AMA APA ГНД NLM

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности.Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

• В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки вашего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
• Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
• Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
• Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
• Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в cookie-файлах может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

Руководство по определениям ферментных единиц и дизайну анализа | Блог Biomol | Ресурсы | Biomol GmbH

Часто возникает путаница в отношении значений «ферментных единиц», «ферментативной активности» и «специфической ферментативной активности».Это руководство объясняет эти ключевые концепции простыми словами и обсуждает дизайн ферментного анализа и важность работы в «линейном диапазоне». Мы также учитываем стандартные кривые и то, следует ли наносить концентрацию или абсолютное количество продукта на ось x. Обсуждаются некоторые советы по настройке контроля анализа и вычитанию холостых проб. Наконец, мы объясняем, как рассчитываются значения активности ферментов, и даем простой обзор кинетических уравнений.

Определения ферментных единиц

Энзимология была бы менее сложной, если бы все использовали одно и то же определение единиц.Стандартное определение единицы приведено ниже:

1 единица (U) — это количество фермента, которое катализирует реакцию 1 мкмоля субстрата в минуту (определение A).

В большинстве случаев НИОКР 1 мкмоль субстрата на самом деле представляет собой довольно много материала, и могут быть предпочтительны другие определения, чтобы не выражать количества в долях единиц. Обычно используется следующее нестандартное определение:

1 единица (U) — это количество фермента, которое катализирует реакцию 1 нмоль субстрата в минуту (определение B).

Обратите внимание, что изменение определения оказывает сильное влияние на указанное количество единиц, т.е. 1 единица фермента согласно определению A будет равняться 1000 единицам согласно определению B!

Вы также можете увидеть единицы фермента, выраженные в миллиединицах (или мЕ), что просто означает тысячную часть единицы, независимо от того, как эта единица была определена.

Очевидно, что фактическое количество фермента в пробирке не может быть изменено простым изменением определения единицы, но требуется осторожность при сравнении активности образцов от разных поставщиков.Пока указаны определения единиц, вы можете преобразовать указанное количество единиц в нмоль в минуту, что однозначно и позволяет проводить достоверные сравнения.

Для ясности в вашей собственной работе вы можете предпочесть использовать «нмоль в минуту» (или «умоль в минуту»), хотя, если требуется постоянное повторение, очевидно, что гораздо более короткий термин «единица» имеет свои преимущества.

Что такое «ферментная активность»

Активность указывается в единицах на мл (Ед / мл), другими словами, нмоль в минуту на мл (если было принято определение единицы измерения B).Таким образом, значения активности, выраженные в единицах, также подвержены иллюзорному 1000-кратному «увеличению», если перейти от определения единицы A к определению единицы B. Опять же не может быть никакой путаницы, если активность выражается в единицах нмоль в минуту на мл, а не единиц на мл.

Поскольку активность связана с концентрацией, из этого следует, что два флакона фермента могут содержать одинаковое количество единиц (всего), но иметь разные активности (концентрации).

Что такое удельная ферментативная активность?

Удельная активность фермента (обычно обозначаемая просто как «удельная активность») — это количество единиц фермента на мл, деленное на концентрацию белка в мг / мл.Поэтому значения удельной активности выражаются в единицах / мг или нмоль / мин / мг (если применяется определение единицы B).

Удельная активность является важным показателем чистоты фермента, и значения для разных партий чистого фермента должны быть одинаковыми в пределах нормальной экспериментальной ошибки.

Серийные разведения раствора фермента будут иметь разные значения активности фермента, но идентичные значения удельной активности, потому что при расчете удельной активности числитель (единицы / мл) и знаменатель (мг / мл) в равной степени зависят от разбавления образца.

Хотя удельная активность сильно отличается от активности, расчет удельной активности, тем не менее, зависит от значения активности, и, следовательно, указанное значение удельной активности также будет зависеть от определения единицы фермента. Партии, у которых значение удельной активности ниже ожидаемого, могут содержать примеси или молекулы ферментов, которые стали денатурированными.

Факторы, влияющие на активность ферментов

В этом разделе мы обсуждаем, почему один фермент может иметь разные значения активности, измеренные в разных лабораториях.Под этим мы подразумеваем реальные различия в измеряемой активности, а не очевидные различия, вызванные использованием разных определений единиц.

Условия, в которых проводится анализ, будут влиять на сообщаемые значения активности. Например, анализы обычно проводят при температуре 20–37 ° C. Вообще говоря, фермент будет более активен при 37 ° C, чем при 20 ° C.

Определение ферментной единицы было бы лучше выразить следующим образом:

1 единица (U) — это количество фермента, которое катализирует реакцию 1 нмоль субстрата в минуту при стандартных условиях.

К сожалению, термин «стандартные условия» открыт для интерпретации, и у пользователей могут быть разные предпочтения, по крайней мере, в среде НИОКР. Таким образом, десять различных исследовательских лабораторий могут (совершенно правильно) рассчитать разные активности для одного и того же раствора фермента. Большинство исследовательских лабораторий устанавливают свои собственные «стандартные условия» и проверяют каждую новую партию внутри компании. В клинических условиях четко определены «стандартные условия», и все лаборатории должны проводить идентичные анализы.

Разработка анализов и важность линейного диапазона

Значение активности (единиц / мл) для вашего фермента является наиболее важным параметром при разработке анализа. Это связано с тем, что объем (то есть количество единиц), который вы добавляете, будет определять количество субстрата, которое преобразуется в продукт. Помните, что 1 единица катализирует превращение 1 нмоль субстрата в минуту (определение B).

Указанные единицы / мл могут дать вам приблизительное представление о том, сколько фермента нужно добавить, но, поскольку значение активности могло быть не определено в тесте, идентичном вашему, обычно готовят серийные разведения фермента (например.грамм. log разведений изначально) и для тестирования фиксированного объема каждого разведения. В зависимости от сигнала анализа (который будет зависеть от количества преобразованного субстрата) может потребоваться второй эксперимент для определения подходящего разведения.

Какое именно разведение является «лучшим»? Чтобы ответить на этот вопрос, нам нужно подумать о самом важном аспекте дизайна анализа — линейном диапазоне. Для количественной работы важно работать в диапазоне, в котором график зависимости сигнала анализа (часто поглощения) от концентрации фермента является линейным.Большинство анализов являются линейными, если степень превращения субстрата менее 15%, при условии отсутствия других ограничивающих факторов. За счет фиксирования времени анализа (например, 30 мин) и температуры (например, 25 ° C) степень превращения можно контролировать, просто регулируя один параметр, то есть количество добавленных единиц фермента.

Это графически проиллюстрировано на Рисунке 1 с разведениями, выраженными как обратные (т. Е. Разведение 1/10 = 0,1 по оси x). Ваш собственный график может отличаться по форме и линейному диапазону, но, несомненно, при очень высокой концентрации фермента сигнал анализа не будет увеличиваться пропорционально количеству добавленного фермента.

Анализ на Рисунке 1 является линейным до оптической плотности (OD) 2,5, и коэффициент разбавления 0,02 (разведение фермента 1/50) был бы идеальным для аналитической работы, поскольку он дает большой сигнал (~ 1,5) и ложный в середине линейного диапазона. Расчеты, основанные на результатах для коэффициентов разбавления в диапазоне от 0,04 до 0,12 (т. Е. Область с уменьшенным наклоном), занижают истинный уровень активности фермента, потому что что-то явно ограничивает величину сигнала анализа.

Многие факторы могут влиять на ограничение линейного диапазона, и диапазон будет варьироваться от анализа к анализу.Одной из распространенных причин нелинейности является чрезмерный расход субстрата, который может вызвать снижение скорости реакции, но ограничения оптических компонентов устройства чтения планшетов (или любого другого используемого измерительного устройства) также могут быть значительными. Большинство ридеров планшетов, например, не могут надежно измерить значения оптической плотности выше 3, и это ограничение будет применяться независимо от процента субстрата, который был преобразован в продукт.

Рис.1.Зависимость абсорбции от количества фермента

Хотя в этом руководстве не обсуждается иное, следует также знать, что ферменты могут денатурировать со временем, особенно если они очень разбавлены, а продукты некоторых реакций могут ингибировать фермент. Действительно, существуют и другие возможные причины нелинейного поведения, но обычно относительно легко найти линейный диапазон методом проб и ошибок, используя серийные разведения фермента, как описано выше.

Время и температура анализа

Эти параметры также могут влиять на линейный диапазон, поскольку они влияют на скорость преобразования субстрата.Например, анализ может быть линейным через 15 минут, но через 60 минут может быть израсходовано слишком много субстрата. В этой ситуации вам придется уменьшить количество фермента, чтобы провести анализ в течение 60 минут. Те же соображения применимы к температуре анализа, так как она также может влиять на скорость реакции.

Большинство людей выбирают время анализа от 15 до 60 минут. Следует избегать очень коротких промежутков времени (например, 2 мин), потому что небольшая задержка в остановке реакции приведет к значительной ошибке в расчетах активности.Перед использованием важно убедиться, что реагенты, хранящиеся в холодильнике или морозильной камере, уравновешены до правильной температуры, и это особенно важно, если у вас относительно короткое время анализа.

Объем / чувствительность анализа

С практической точки зрения объем анализа определяется / ограничивается расходным материалом, который вы используете для своих анализов (например, кюветами, пробирками или микропланшетами). Сигнал для большинства ферментных анализов пропорционален объему анализа и пытается уменьшить размер анализа (например,грамм. для экономии реагентов) обычно приводит к более низким сигналам. Однако анализы абсорбции часто являются исключением, и переключение с кюветы на 3 мл на микрокювету на 1 мл, например, не изменит показания абсорбции, если ширина (длина пути) кюветы все еще составляет 1 см (т. Е. Свет все еще остается проходит через ту же «длину» жидкости). Это связано с тем, что оптическая плотность пропорциональна длине пути, а не , а не объему образца.

В тестах поглощения микропланшетов длина пути равна глубине жидкости, и можно уменьшить размер без потери сигнала, уменьшив диаметр лунок и поддерживая постоянную глубину жидкости.Например, 96-луночные планшеты могут легко вместить 200 мкл образца, но с объемом анализа 50 мкл было бы лучше использовать 384-луночный планшет, чтобы увеличить длину пути по сравнению с 50 мкл образца в 96-луночном планшете.

Непрерывные анализы (измерение внешнего вида продукта во времени)

Большинство анализов проводят в течение фиксированного периода времени (анализы конечной точки), и реакцию останавливают добавлением стоп-реагента (например, кислоты). Однако в непрерывных анализах внешний вид продукта (реже потребление субстрата) регистрируется непрерывно (например,грамм. с помощью самописца). Применяются те же основные правила; график зависимости сигнала от времени для фиксированного количества фермента должен быть линейным, а скорость должна удвоиться, если количество фермента удвоится. Пока анализ проводится в линейном диапазоне, активность разбавленных соответствующим образом «неизвестных» может быть точно определена по начальным скоростям реакции, измеренным с помощью набора стандартов.

Какую концентрацию субстрата мне следует использовать?

Концентрация субстрата будет влиять на скорость реакции, но есть несколько факторов, которые следует учитывать при выборе «правильной» концентрации.С практической точки зрения одним из ключевых факторов является количество продукта, которое должно быть произведено, чтобы дать измеримый сигнал анализа. Поскольку скорость ферментативной реакции, вероятно, упадет, когда более чем примерно 15% субстрата гидролизовано, начальная концентрация субстрата обычно должна быть по крайней мере в 10 раз больше концентрации продукта, которая, как известно, дает приемлемый сигнал анализа.

Еще одно соображение — это км для подложки. Хотя добавление большего количества субстрата обычно означает, что вы увидите более высокие значения активности, зависимость не является линейной, и, возможно, придется учитывать стоимость субстрата.Здесь, вероятно, будет полезно ввести классическое уравнение Михаэлиса-Ментен:

v = (Vmax S) / (Km + S) ……………. Уравнение. (1)

где v — скорость, Vmax — максимально возможная скорость, S — концентрация субстрата, а Km — концентрация субстрата, которая дает половину максимальной активности. Вывод этого уравнения и лежащие в его основе предположения можно найти в любом учебнике по кинетике ферментов. Хотя обычно измеряет , а не рассчитывает скорость ферментативных реакций, полезно понимать основные принципы для целей разработки анализа.

Уравнение Михаэлиса-Ментен полезно тем, что помогает выбрать подходящую концентрацию субстрата, если известен Km.

Когда S = Km, v = (Vmax S) / 2S, т.е. v / Vmax = S / 2S = ½.

Другими словами, фермент будет работать на 50% от максимально возможной скорости, когда S = Km.

Подставив в уравнение 1 значения для S = 10 и Km = 1, вы увидите, что при увеличении концентрации субстрата в 10 раз фермент теперь работает на ~ 90% от максимально возможной скорости вместо 50%.Ясно, что это больше, но не в 10 раз больше.

При очень высоких концентрациях субстрата Km в уравнении 1 численно становится несущественным, и измеренная скорость тогда равна Vmax.

Многие анализы проводятся с концентрацией субстрата, равной или близкой к значению Km, но если Km очень высока, может оказаться невозможным использовать такую ​​высокую концентрацию субстрата (например, по причинам стоимости или ограниченной растворимости).

В некоторых ситуациях может быть даже целесообразно использовать относительно низкую концентрацию субстрата.Например, при открытии фармацевтических препаратов использование очень высоких концентраций субстрата затруднит идентификацию конкурентных ингибиторов ферментов (конкурентные ингибиторы связываются с тем же сайтом, что и субстрат).

Необходимо соблюдать баланс различных факторов, чтобы анализ имел измеримый сигнал, мог работать в линейном диапазоне и отвечал любым другим целям анализа (например, стоимость, время и т. Д.).

Стандартные кривые

Стандартные кривые всегда требуются, если вы хотите рассчитать активность ферментов.Это не обязательно, если вас интересуют только относительных значений активности .

Стандартная кривая строится путем измерения сигнала анализа со стандартными растворами продукта реакции в подходящем диапазоне концентраций. В идеале вы должны запускать стандартную кривую для каждого эксперимента, но если стандартная кривая хорошо воспроизводима, может быть приемлемым запускать ее периодически.

Типичная стандартная кривая показана на Рисунке 2 ниже. Это стандартная кривая для анализа АТФазы, в котором АТФ гидролизуется до АДФ и Pi (неорганический фосфат).

Рис. 2. Стандартная кривая для P _i

Фосфат обнаруживается с помощью связывающего краситель реагента, который меняет цвет в присутствии фосфата. Однако специфика этого теста здесь не важна; независимо от природы продукта или используемого метода обнаружения, необходимо построить стандартную кривую, показывающую зависимость сигнала от количества продукта в анализе. «Кривая» (в идеале — прямая линия) используется для определения количества продукта, образующегося в образцах с неизвестной активностью i.е. от значения оптической плотности, считывая точку пересечения на оси абсцисс. (Большинство пакетов графического программного обеспечения автоматически вычисляют значения x из измеренных значений y). Затем можно рассчитать уровень активности (см. Ниже).

Отображать концентрацию или абсолютное количество по оси X?

Здесь нет единственного правильного ответа, и возможность использования любого из подходов часто может вызвать путаницу при вычислении значений активности. Например, нанесение нанометров продукта на ось x очень удобно, если вам нужно рассчитать значения активности (помните, что активность = нмоль в минуту на мл).Однако лабораторные реагенты обычно готовятся при известных концентрациях , и часто бывает проще нанести эти значения на ось x. Однако, когда вы рассчитываете активность (или удельную активность) вашего фермента, вы должны помнить, что нужно преобразовать концентрацию по оси абсцисс в количество нмолей образовавшегося продукта, что означает, что вы должны учитывать анализируемый объем. Причина понятна: объемы стандартного раствора 50 мкл и 100 мкл будут иметь одинаковую концентрацию, но больший объем будет содержать вдвое больше продукта.Как правило, лучше всего выбрать один подход (т. Е. Построить график абсолютного количества продукта или концентрации), чтобы всегда использовался один и тот же метод расчета активности.

Контроль и вычитание «пустых» данных

Правильный контроль жизненно важен для количественной работы, так же как и правильное использование контрольных данных в расчетах.

Контроли говорят вам (косвенно), какая часть сигнала анализа связана с действием фермента, а какая — по другим причинам.Распространенным источником «ложного» сигнала является субстрат (который часто может быть загрязнен продуктом). Другие компоненты анализа также могут давать небольшой сигнал в зависимости от природы компонентов и типа анализа. Назначение элементов управления — позволить вам удалить (путем вычитания) любые элементы общего сигнала, не связанные с действием фермента. Если анализ хорошо спроектирован и реагенты для анализа хорошего качества, обработка контролей обычно довольно проста.

Некоторые общие рекомендации приведены ниже:

Если мы вернемся к колориметрическому анализу для обнаружения неорганического фосфата, мы сможем выделить некоторые потенциальные проблемы, которые легко обнаруживаются с помощью надлежащих контролей.

Реагент для обнаружения фосфатов дает низкое значение около 0,08 в 96-луночном планшете при длине волны, используемой для измерения (около 650 нм).

Мы могли бы настроить следующие анализы / контроли (показания в скобках в гипотетической ситуации анализа):

1. Все компоненты анализа за вычетом фермента (0,5)
2. Собственный фермент (0,1)
3. Фермент плюс все другие компоненты ( 1.8)

Очевидно, что тестовый сигнал 1,8 не является результатом исключительно действия фермента на субстрат.

Для любого ферментного анализа ключевым контролем (A) является исключение фермента (и замена его буфером). Это даст вам фоновый сигнал для всех других компонентов анализа как группы, включая субстрат, который может содержать небольшое количество продукта. Этот контроль не сообщает вам фоновый сигнал для фермента, но очевидно, что вы не можете добавить фермент к субстрату в качестве контроля! В большинстве анализов фермент не дает сигнала, потому что он значительно разбавляется перед использованием в анализе.Это легко проверить, как в пункте B выше.

Данные для образца A (выше) предполагают, что смесь загрязнена неорганическим фосфатом. Затем можно проверить отдельные компоненты, чтобы определить источник проблемы. Эта ситуация довольно обычна для анализов АТФаз и других ферментов, генерирующих фосфаты, поскольку субстраты часто нестабильны и частично гидролизуются с образованием некоторого количества неорганического фосфата.

Может быть неудобно исправлять необработанные данные, если несколько компонентов выдают ложные сигналы; Устранение проблемы в ее источнике обычно намного лучше, чем любая математическая обработка.«Скорректированное» значение для образца C выше может показаться равным 1,2 (т.е. 1,8 — 0,5 — 0,1), но, строго говоря, это неверно. Помните, что аналитический планшет плюс реагент для обнаружения дают фоновый сигнал около 0,08, поэтому источником большей части сигнала для контроля A является пластик планшета и / или реагент обнаружения. Такой же слабый сигнал также должен быть скрыт в пределах значения для ферментного контроля. Таким образом, в примененной выше коррекции мы дважды вычитали этот скрытый пробел.

Вам всегда нужно вычитать контроли из данных анализа, и желательно объединить все вещества (кроме фермента) и вычесть одно значение.Если выбран этот подход, стандартная кривая обрабатывается таким же образом и вычитается контрольное значение (т. Е. Значение, полученное в отсутствие продукта, то есть аналогично бланку планшета / реагента, обсужденному выше). Таким образом, ни вычтенные данные анализа, ни вычтенная стандартная кривая не содержат потенциально вводящего в заблуждение фонового сигнала, вызванного планшетом / реагентом для анализа.

Наконец, как мы видели, ложные сигналы легко обнаруживаются с помощью надлежащих контролей, но лучшая стратегия для получения данных хорошего качества — использовать реагенты с низким фоном, чтобы значения контроля были низкими.Также полезно генерировать сигнал анализа (из-за фермента), который намного выше, чем любой фоновый сигнал. В идеале отношение сигнал / фон должно быть не менее 5, а предпочтительно 10 или более для точной количественной работы.

Расчет значений активности

Это довольно легко понять, если мы пошагово произведем обратный расчет на основе исходных данных анализа. Например, предположим, что мы получили 10 нмоль продукта в нашей ферментативной реакции (т.е. определено по стандартной кривой зависимости сигнала от абсолютного количества продукта).Поскольку активность выражается в нмоль в минуту на мл, нам необходимо учитывать время и объем и, что, возможно, менее очевидно, количество и разведение фермента, чтобы рассчитать активность.

Если анализ длится 10 минут, количество нмоль в минуту в приведенном выше примере равно 1. (этап 1)

Если объем анализа составляет 200 мкл, нам нужно умножить на 5 (т.е. 1000/200), чтобы получить нмоль. в минуту на мл. (этап 2)

Это значение относится к активности фермента в анализе, а не в образце фермента, использованном для настройки анализа.Некоторые дополнительные поправочные коэффициенты необходимы для определения активности фермента в исходном образце фермента.

Фермент мог быть разбавлен перед использованием, и он должен быть дополнительно разбавлен другими компонентами, присутствующими в анализе. Если анализ (всего 200 мкл) включает 20 мкл фермента, и фермент предварительно разбавлен 1/100 перед добавлением образца 20 мкл, вы, вероятно, увидите, что нам следует сначала умножить на 10 (шаг 3), а затем на 100 ( шаг 4), чтобы получить активность фермента в исходном растворе фермента .

Пока это относительно просто. Однако мы упоминали ранее, что концентрация часто наносится на ось x стандартной кривой. Таким образом, значения могут быть выражены в миллиметрах (не в ммоль), и вы не можете определить количество в миллимолях, просто изучив стандартную кривую.

Поскольку мМ означает миллиметры на литр, у нас есть расхождение между предполагаемым объемом 1 л и фактическим объемом анализа. Таким образом, если у нас есть 10 мМ продукта, а объем анализа составляет 200 мкл, нам нужно разделить на 5000, чтобы получить количество ммолей продукта.

Здесь вы можете заметить, что деление на 5000 смещает некоторые операции умножения, которые требовались выше. Действительно, компенсация поправочных коэффициентов является вполне нормальным явлением. Например, в 10-минутном анализе с использованием фермента, разведенного 1/10, вы разделите на 10, чтобы получить нмоль в минуту, и умножьте на 10 позже, чтобы скорректировать коэффициент разбавления.

Отсюда следует, что если вы всегда используете стандартные условия анализа (например, ваш стандарт ), вы сможете умножить значение «x» из стандартной кривой на один глобальный поправочный коэффициент, который включает в себя все другие индивидуальные поправочные коэффициенты. , чтобы рассчитать значения вашей активности.Только в первом случае вам нужно определить индивидуальные поправочные коэффициенты.

Ингибирование ферментов / скрининг лекарственных средств

Это область энзимологии, где остается необходимость работать в линейном диапазоне, но где расчеты значений активности обычно не актуальны; скорее, относительная скорость реакции (или относительное количество образующегося продукта) в присутствии и в отсутствие тестируемого вещества является ключевым фактором, который требует немного большего, чем простые вычисления с использованием данных анализа с вычитанием холостого опыта.После вычитания пробелов количество образовавшегося продукта выражается в процентах от количества, полученного в отсутствие исследуемого вещества (т.е. 100%). Эти анализы иногда можно проводить с довольно низкими отношениями сигнал / фон, потому что задается вопрос — ингибирует ли тестируемое вещество реакцию?
— требуется только ответ да / нет.

Резюме

Мы надеемся, что это руководство предоставило четкие объяснения «ферментных единиц», «ферментативной активности» и «специфической ферментативной активности», а также определения единиц и важности «линейного диапазона».Специфика того, что наносить на ось x стандартных кривых, зависит от предпочтений пользователя, но при вычислении действий требуется некоторая осторожность. Контроли анализа важны, но использование реагентов высокого качества лучше, чем удаление фона с помощью математических подходов. Для количественной работы желательно высокое отношение сигнала к фону, и для увеличения сигнала анализа можно изменять ряд параметров; не всегда необходимо просто добавлять больше фермента. Значения активности фермента можно легко рассчитать, если использовать пошаговый подход для определения ключевых переменных анализа.

См. Дополнительные протоколы и руководства

Основные сведения о плитке и секреты подложки — Фарфоровый супермаркет

Современный дизайн керамической плитки настолько красочен, разнообразен и красив, что слишком легко упустить из виду основы безотказной укладки. Сюда входит выбор подходящего клея, затирки, отделки и даже деформационных швов: все темы мы рассмотрим отдельно.

В этой статье с практическими рекомендациями техническая группа Porcelain Superstore просто хочет подчеркнуть жизненную важность использования правильного мозаичного фона.Неважно, какую плитку вы выберете — керамическую, фарфор, натуральный камень, стекло и т. Д. — если вы не используете подходящую основу или не подготовите ее должным образом, вы рискуете скомпрометировать свою новую красивую схему укладки плитки.

Но не волнуйтесь. Создать подходящую основу под плитку достаточно просто. Есть много высокопроизводительных и недорогих продуктов, которые помогут плиточнику своими руками. И, если вы устанавливаете плитку, большинство профессиональных плиточников знакомы с широким спектром проверенных и эффективных вариантов.

Британские стандарты

BS 5385 гласит, что фанера и другие древесные листы или доски не должны использоваться для прямой облицовки стен плиткой; гипсокартон и гипсокартон нельзя использовать для непосредственного крепления во влажных помещениях. Чтобы восполнить этот пробел, сегодня на рынке появляется все больше запатентованных подкладных плит для плитки из различных материалов, толщины и веса, которые обеспечивают достаточно жесткую основу для облицовки плиткой.

Несущая способность особенно важна, когда речь идет об облицовке стен.Например, стандартная стена из гипсокартона или стена из гипсокартона толщиной 12,5 мм, покрытая гипсовой штукатуркой, может выдерживать вес плитки не более 20 кг на квадратный метр.

Помните, что это совокупный вес, который включает клей и раствор, а также саму плитку.

Для стены из гипсокартона толщиной 12,5 мм без облицовки максимальный вес плитки выше — 32 кг на квадратный метр. Для стен с отделкой из цементно-песчаной штукатурки обычно нет ограничений по весу плитки.

Плиточные подкладочные плиты

В последнее время, после внесения изменений в Строительные нормы и правила, все больше и больше установок для облицовки стен и полов используют специально изготовленные подкладочные плиты для плитки. К ним относятся легкие плиты с пенопластом, максимальная несущая способность плитки которых составляет 60 кг на квадратный метр. Армированные стекловолокном плиты на основе цемента могут достигать веса 50 кг на квадратный метр, а гипсоволокнистые плиты — 40 кг на квадратный метр.